安捷倫液相色譜柱在使用前不妨先來(lái)看下這篇文章吧
安捷倫液相色譜柱中色譜是一種分離分析手段,分離是核心,因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好,分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料好多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹(shù)脂)、多孔碳等,其粒度一般為3,5,7,10um等,柱效理論值可達5~16萬(wàn)/米。
對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析,只要500即可;對于較難的分離物質(zhì)對則可采用高達2萬(wàn)的柱子,因此一般10~30cm左右的柱長(cháng)就能滿(mǎn)足復雜混合物分析的需要。
安捷倫液相色譜柱在使用前應先了解下面這些知識:
(1)液相色譜柱色譜柱使用前注意事項:
液相色譜柱的儲存液無(wú)特殊說(shuō)明,均為評價(jià)報告所示的流動(dòng)相。在使用前,一定要注意液相色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動(dòng)相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過(guò)渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易析出,堵塞色譜柱。
(2)流動(dòng)相:
流動(dòng)相中所使用的各種有機溶劑要盡可能使用色譜純,配流動(dòng)相的水好是超純水或全玻璃器皿的雙蒸水。如果將所配得流動(dòng)相再經(jīng)過(guò)0.45μm 的濾膜過(guò)濾一次則更好,尤其是含鹽的流動(dòng)相。另外,裝流動(dòng)相的容器和色譜系統中的在線(xiàn)過(guò)濾器等裝置應該定期清洗或更換。
以常規硅膠為基質(zhì)的鍵合相填料通常的pH值適用范圍是2.0-8.0。當必須要在pH值適用范圍的邊界條件下使用色譜柱時(shí),每次使用結束后立即用適合于色譜柱儲存并與所使用的流動(dòng)相互溶的溶劑清洗,并*置換掉原來(lái)所使用的流動(dòng)相。
(3)樣品:
樣品也要盡可能清潔,可選用樣品過(guò)濾器或樣品預處理柱(spe)對樣品進(jìn)行預處理;若樣品不便處理,要使用保護柱。在用正相色譜法分析樣品時(shí),所有的溶劑和樣品應嚴格脫水。
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