安捷倫氣相色譜柱是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質(zhì)的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球(包括離子交換樹(shù)脂)、多孔碳等，其粒度一般為3，5，7，10μm等，柱效理論值可達5~16萬(wàn)/米。對于一般的分析只需5000塔板數的柱效;對于同系物分析，只要500即可;對于較難分離物質(zhì)對則可采用高達2萬(wàn)的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長(cháng)就能滿(mǎn)足復雜混合物分析的需要。

　　柱效受柱內外因素影響，為使色譜柱達到理想的效率，除柱外死體積要小外，還要有合理的柱結構(盡可能減少填充床以外的死體積)及裝填技術(shù)。即使好的裝填技術(shù)，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情況總是不一樣的，靠近管壁的部位比較疏松，易產(chǎn)生溝流，流速較快，影響沖洗劑的流形，使譜帶加寬，這就是管壁效應。這種管壁區大約是從管壁向內算起30倍粒徑的厚度。在一般的安捷倫氣相色譜柱系統中，柱外效應對柱效的影響遠遠大于管壁效應。

　　評判安捷倫氣相色譜柱的好壞：

　　使用前都要對其性能進(jìn)行考察，使用期間或放置一段時(shí)間后也要重新檢查。柱性能指標包括在一定實(shí)驗條件下下的柱壓、理論塔板數、對稱(chēng)因子、容量因子和選擇性因子的重復性，或分離度。一般說(shuō)來(lái)容量因子和選擇性因子的重復性在±5%或±10%以?xún)?。進(jìn)行柱效比較時(shí)，還要注意柱外效應是否有變化。具體操作方法如下：

　　1.在進(jìn)行樣品檢測前，至少使用20倍柱體積流動(dòng)相使色譜柱充分平衡。流動(dòng)相一定要使用色譜級別的溶劑。如使用水相的緩沖液應當天配制以保持新鮮避免細菌產(chǎn)生。

　　2.流動(dòng)相使用前需用微孔濾膜過(guò)濾，消除流動(dòng)相中顆粒對色譜系統和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動(dòng)相混合后應重新過(guò)濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應使用純水作為流動(dòng)相沖洗C18色譜柱，以免柱性能損壞。

　　3.流動(dòng)相需脫氣后使用，可避免因氣泡導致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時(shí)使用的流動(dòng)相與安捷倫氣相色譜柱保存使用的流動(dòng)相有較大區別，應該使用過(guò)度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動(dòng)相的突然變化造成柱壓增加過(guò)大或流動(dòng)相緩沖鹽結晶造成對色譜柱和儀器系統的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長(cháng)的平衡時(shí)間。